Описание изобретения к патенту



РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА
ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ,
ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ

(19)

RU

(11)

2286053

(13)

C2

(51) МПК

A01H4/00 (2006.01)
A01H5/00 (2006.01)

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

Статус: по данным на 28.04.2010 - действует

(21), (22) Заявка: 2005104318/12, 17.02.2005

(24) Дата начала отсчета срока действия патента:
17.02.2005

(43) Дата публикации заявки: 27.07.2006

(46) Опубликовано: 27.10.2006

(56) Список документов, цитированных в отчете о
поиске: SU 1695854 A1, 07.12.1991. RU 2180165 C2, 10.03.2002. EP 0244211 A, 04.11.1987. US 4338745 A, 13.07.1982. WO 8802211 A, 07.04.1988.

Адрес для переписки:
430000, г.Саранск, ул. Большевистская, 68, ГОУВПО "МГУ им. Н. П. Огарева", отдел патентов и стандартов

(72) Автор(ы):
Мокшин Евгений Владимирович (RU),
Лукаткин Александр Степанович (RU)

(73) Патентообладатель(и):
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Мордовский государственный университет им. Н. П. Огарева" (RU)

(54) СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ГЛАДИОЛУСА IN VITRO

(57) Реферат:

Изобретение относится к области садоводства и может быть использовано для микроразмножения и оздоровления растений гладиолуса in vitro. Способ включает вычленение эксплантов, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, культивирование, разделение их на сегменты. После вычленения экспланты высаживают на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга, с 1/4 концентрации макро - и микросолей при постоянном освещении люминесцентными лампами с интенсивностью 3000-3500 лк при температуре 22-24°С. Затем размноженные экспланты переносят на агаризованную питательную среду с 1/2 концентрации солей по прописи Мурасиге-Скуга, которую дополняют 30-40 г/л сахарозы и регуляторами роста 0,5-1,0 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5-1,0 мг/л -нафтилуксусной кислоты. Кроме того, параллельно культивирование проводят также через каллусогенез на агаризованной питательной среде, дополненной 0,5-1,0 мг/л 6-бензиламинопурина и 1,0-1,5 мг/л 2,4-дихлорфеноксиуксуной кислоты, с последующим укоренением на агаризованной питательной среде с половинной концентрацией солей по прописи Мурасиге-Скуга, дополненной 0,5-1,5 мг/л -нафтилуксусной кислоты, 30-40 г/л сахарозы и 4-5 г/л активированного угля. Изобретение позволяет повысить выход размножаемого материала за счет увеличения интенсивности побегообразования, улучшения роста и развития эксплантов. 3 табл.

Изобретение относится к области цветоводства и может быть использовано для микроразмножения и оздоровления растений гладиолуса in vitro.

Известен способ микроразмножения гладиолуса, включающий вычленение экспланта, посадку его на питательную среду, культивирование, разделение на сегменты (SU №1695854, МПК 7 А 01 Н 4/00, 07.12.1991 г.).

Недостатком данного способа является невысокий коэффициент размножения на разных этапах культивирования.

Технический результат заключается в повышении выхода размножаемого материала за счет увеличения интенсивности побегообразования, улучшения роста и развития эксплантов при положительном влиянии оптимальной концентрации минерального и органического питания регуляторов роста.

Сущность изобретения заключается в том, что в способе размножения гладиолуса in vitro, включающем вычленение эксплантов, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, культивирование, разделение их на сегменты, после вычленения экспланты высаживают на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга с 1/4 концентрации макро - и микросолей при постоянном освещении люминесцентными лампами с интенсивностью 3000-3500 лк при температуре 22-24°С. Затем размноженные экспланты переносят на агаризованную питательную среду с 1/2 концентрации солей по прописи Мурасиге-Скуга, которую дополняют 30-40 г/л сахарозы и регуляторами роста 0,5-1,0 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5-1,0 мг/л -нафтилуксусной кислоты, кроме того, параллельно культивирование проводят также через каллусогенез на агаризованной питательной среде, дополненной 0,5-1,0 мг/л 6-бензиламинопурина и 1,0-1,5 мг/л 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты, с последующим укоренением на агаризованной питатальной среде с половинной концентрацией солей по прописи Мурасиге-Скуга, дополненной 0,5-1,5 мг/л -нафтилуксусной кислоты, 30-40 г/л сахарозы и 4-5 г/л активированного угля.

Добавление сахарозы в питательную среду более 40 г/л снижает рост и развитие эксплантов.

При 1/4 концентрации макро - и микросолей и интенсивности освещения 3000-3500 лк при температуре 22-24°С наблюдается наибольшее образование побегов эксплантов гладиолусов (табл.1).

Добавление в питательную среду регуляторов роста с концентрациями 0,5-1,0 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5-1,0 мг/л -нафтилуксусной кислоты, 1,0-1,5 мг/л 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты наиболее оптимально для роста эксплантов гладиолусов и не вызывает токсического действия (табл.2, 3).

Способ осуществляют следующим образом.

В качестве эксплантов берут пазушные и апикальные почки гладиолуса, стерилизуют и в стерильных условиях высаживают в колбы на питательную среду Мурасиге-Скуга с рН 5,8-5,9, содержащую 7,0-7,5 г/л агара. Для экспериментальной проверки предлагаемого способа на этапе введения в культуру варьируют концентрацию макро - и микросолей в питательной среде (табл.1).

Таблица 1

Концентрация минеральных солей по прописи Мурасиге-Скуга(часть)

Побегообразование, штук/эксплант

1

3,7±0,3

1/2

3,3±0,3

1/4

4,6±0,8

1/8

2,5±0,1

Культивирование проводят при постоянном освещении белыми люминесцентными лампами с интенсивностью 3000-3500 лк при температуре 22-24°С. В течение 3-4 недель культивирования на среде с 1/4 концентрации макро - и микросолей по прописи Мурасиге-Скуга образуется максимальное число побегов, которые отделяют от почки и пересаживают на питательную среду Мурасиге-Скуга для последующего микроразмножения. На этапе собственно микроразмножения субкультивирование побегов проводят на среде, содержащей 1/2 концентрации солей по прописи Мурасиге-Скуга, дополненной 30-40 г/л сахарозы и регуляторами роста: 0,5-1,5 мг/л 6-бензиламинопурином и 0,5-1,5 мг/л -нафтилуксусной кислотой (табл.2).

Таблица 2

Побегообразование

Концентрация, мг/л

6-бензиламинопурин

0,5

1,0

1,5

-нафтилуксусная кислота

0,5

1,0

1,5

0,5

1,0

1,5

0,5

1,0

1,5

Количество, штук

14,2±0,5

12,5±0,5

8,3±0,2

5,5±0,1

4,3±0,4

3,5±0,3

2,1±0,2

2,0±0,2

1,5±0,3

Наряду с прямой регенерацией растений из первичного экспланта на данном этапе процесса клонального микроразмножения регенерацию растений проводят также через каллусогенез, для чего в питательную среду добавляют 0,5-1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5-1,5 мг/л 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты (табл.3).

Таблица 3

Побегообразование

Концентрация, мг/л

6-бензиламинопурин

0,5

1,0

1,5

2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота

0,5

1,0

1,5

0,5

1,0

1,5

0,5

1,0

1,5

Количество, штук

15,3±0,3

17,5±0,4

15,6±0,6

12,4±0,5

12,6±0,6

9,4±0,2

-

-

-

Укоренение проводят на питательной среде Мурасиге-Скуга с 1/2 концентрации минеральных солей, дополненной 30-40 г/л сахарозы, 0,5-1,5 мг/л -нафтилуксусной кислоты, 4-5 г/л активированного угля. После укоренения размноженные растения переносят в почву и выращивают обычным способом.

В результате использования данного способа клонального микроразмножения гладиолуса величина побегообразования на этапе введения в культуру in vitro составила 4,6 побега/эксплант, на этапе собственно микроразмножения - от 14,2 (через пассирование пазушных побегов) до 17,5 побегов/эксплант (через каллусогенез). Процент укоренения составил 100%, что приводит к высокой жизнеспособности растений-регенерантов при последующей высадке в почву.


Формула изобретения

Способ размножения гладиолуса in vitro, включающий вычленение эксплантов, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, культивирование, разделение их на сегменты, отличающийся тем, что после вычленения экспланты высаживают на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга, с 1/4 концентрации макро - и микросолей при постоянном освещении люминесцентными лампами с интенсивностью 3000-3500 лк при температуре 22-24°С, затем размноженные экспланты переносят на агаризованную питательную среду с 1/2 концентрации солей по прописи Мурасиге-Скуга, которую дополняют 30-40 г/л сахарозы и регуляторами роста 0,5-1,0 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5-1,0 мг/л -нафтилуксусной кислоты, кроме того, параллельно культивирование проводят также через каллусогенез на агаризованной питательной среде, дополненной 0,5-1,0 мг/л 6-бензиламинопурина и 1,0-1,5 мг/л 2,4-дихлорфеноксиуксуной кислоты, с последующим укоренением на агаризованной питательной среде с половинной концентрацией солей по прописи Мурасиге-Скуга, дополненной 0,5-1,5 мг/л -нафтилуксусной кислоты, 30-40 г/л сахарозы и 4-5 г/л активированного угля.


Очумелые ручки
полезные идеи для начинающих изобретателей и настоящих мастеров

Проекты по теме списка:

Оставить свой комментарий

Комментировать на сайте могут только те, кто имеет свой аккаунт. Войти или Зарегистрироваться.


Обсуждение






Pandia в социальных сетях